Emprisonnés, les frères Dalton sont surveillés par Rantanplan, le chien fidèle et stupide. Ils apprennent que leur oncle Henry vient d'être pendu et qu'il leur a légué ses biens. Mais avant de pouvoir y toucher, les frères Dalton doivent retrouver le juge et les jurés qui ont condamné leur oncle à mort...
Au Mexique, deux amis Gringo et Lucas voyagent en train jusqu’à Durango, dans l'espoir de faire fortune. Mais le train est attaqué par la bande de Lobo. Les bandits attaquent les voyageurs, pillent leurs affaires et emportent un coffre-fort. Échappant au massacre, Gringo et Lucas se retrouvent en possession de la clé de ce coffre, et se lancent à la poursuite des brigands… et du magot.
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